Молекулярная медицина. Рубрика в журнале - Вестник Российского научного центра рентгенорадиологии Минздрава России

Исследование уровня экспрессии гена TERT в слизистой оболочке толстой кишки при различной патологии

Боженко В.К., Захаренко М.В., Кулинич Т.М., Джикия Е.Л., Сенчукова А.Л., Станоевич У.С., Грунин И.Б., Мельникова Н.В., Крашихина Т.В., Близнюков О.П., Гончаров С.В., Кудинова Е.А.

Статья научная

Введение. По статистике злокачественных новообразований в России колоректальный рак является второй по значимости причиной смерти от онкологических заболеваний у обоих полов. Болезнь прогрессирует как многоступенчатый процесс и связана с генетическими изменениями. Одной из характерных особенностей рака является изменение в активности теломеразы обратной транскриптазы ( TERT) , чаще ее активация. В данном исследовании проведено сравнение экспрессии гена TERT в тканях аденокарциномы, аденомы и морфологически неизмененных тканях (МНТ) при гиперпролиферативной патологии в разных отделах ободочной и прямой кишки.Цель работы: проведение сравнительного анализа изменений экспрессии маркера пролиферации - гена TERT при доброкачественных и злокачественных новообразованиях толстой кишки, где в качестве референсных значений используется экспрессия в неизмененной слизистой толстой кишке здоровых доноров.Материалы и методы. С использованием метода RT-PCR проведен анализ изменений экспрессии маркера пролиферации - гена TERT в отделах толстой кишки. В анализ взяты образцы тканей аденокарциномы толстой кишки (n=193), МНТ края резекции (около 15 - 20 см от опухолевого узла) (n=230), аденомы (n=21), неизмененной слизистой оболочки толстой кишки при аденоме (в 10 - 15 см от аденомы) (n=58), визуально не измененной слизистой здоровых доноров (n=174). Ткани аденокарциномы и МНТ края резекции получены во время оперативного лечения. Ткани аденомы, МНТ при аденоме и неизмененные ткани здоровых доноров получены во время профилактической колоноскопии.Результаты. Уровень экспрессии гена TERT в тканях толстой кишки здоровых доноров был значительно выше, чем в неизмененных тканях толстой кишки при доброкачественной и злокачественной пролиферативной патологии. Согласнолитературным данным, в работах, где в качестве “нормы” использовали неизмененную ткань пораженного органа, уровень экспрессии TERT был ниже, чем в опухолевой ткани. Это подчеркивает важность использования в качестве контроля морфологически неизмененных тканей здоровых доноров.

Бесплатно

Исследование уровня экспрессии мРНК генов CCNB1 и TERT при предраковых заболеваниях и раке шейки матки

Боженко В.К., Кулинич Т.М., Мельникова Н.В., Антонова И.Б., Джикия Е.Л., Захаренко М.В.

Статья научная

Представлены результаты анализа экспрессии генов CCNB1 (циклин В1) и TERT (каталитическая субъединица теломеразы) при предраковых заболеваниях и раке шейки матки. Циклин В1 является одним из основных регуляторов пролиферации клетки, активность образования комплекса циклин В1-Cdk1 контролирует вступление клетки в митоз, переход G2/M. Функции TERT не ограничены удлинением теломер, это и синтез РНК на РНК-матрице, и усиление клеточной пролиферации, подавление апоптоза, регуляция ответа на повреждение ДНК, увеличение срока жизни клетки. Исследование изменений генов CCNB1 и TERT при предраковых процессах вносит вклад в понимание молекулярных механизмов канцерогенеза, а также позволяет оценить потенциал тестирования экспрессионных изменений CCNB1 и TERT для дифференциальной диагностики патологических процессов шейки матки.

Бесплатно

Исследование экспрессии мРНК маммаглобина а при различной патологии молочных желез

Боженко В.К., Васкевич Е.Ф., Чазова Н.л, Мельникова Н.В., Кудинова Е.А., Джикия Е.Л., Буйнова Д.С.

Статья научная

Выполнен анализ экспрессии мРНК маммаглобина методом количественного ПЦР в реальном времени в 69 образцах ткани рака молочной железы, 42 образцах фиброаденомы молочной железы и 98 образцах нормальной ткани молочной железы. Показано, что в злокачественной опухоли экспрессия мРНК маммаглобина выше, чем при фиброаденоме или в нормальной ткани молочной железы. Экспрессия маммаглобина снижалась по мере увеличения размеров опухоли и роста метастатического потенциала или гистологических признаков злокачественности. Таким образом, мРНК маммаглобина может использоваться в качестве тканеспецифического маркера различных патологий молочной железы. Ключевые слова: маммаглобин А, мРНК, рак молочной железы

Бесплатно

Исследование эффективности различных вариантов химерных Т-клеточных рецепторов относительно РЭА-позитивных опухолевых клеток

Боженко В.К., Князева А.Д., Киселева Я.Ю., Кулинич Т.М., Шишкин А.М.

Статья научная

Резюме Онкологические заболевания являются одной из основных причин смертности по всему миру. Иммунные клетки оказывают влияние на развитие злокачественных опухолей. Разрабатываются методы противоопухолевой терапии, основанные на модификации и активации собственных иммунных клеток так, чтобы они могли избирательно поражать только опухолевые клетки. Раковый эмбриональный антиген (РЭА) является одним из самых распространенных и универсальных маркеров для большинства опухолей. После модификации лимфоцитов плазмидами PCI-1С6-CAR и PCI-3C1-CAR-new, несущими кодирующие последовательности разных антигенов Т-клеточного рецептора, было проведено исследование цитотоксической активности модифицированных лимфоцитов в отношении РЭА-положительных опухолевых клеток. Было показано, что данные лимфоциты избирательно поражают клетки, экспрессирующие РЭА. Также было проведено сравнение противоопухолевой активности лимфоцитов, трансфицированных разными плазмидами, и показана наибольшая цитотоксическая активность лимфоцитов, трансфицированных плазмидой PCI-3C1-CAR-new в отношении клеток культур А549 и НСТ116.

Бесплатно

Молекулярно-генетические маркеры при колоректальном раке

Телышева Е.Н., Новикова Е.И., Снигирева Г.П.

Статья научная

В статье представлен анализ и систематизация информации о молекулярно-генетических маркерах, имеющих первостепенное значение для выбора оптимальной тактики ведения больных колоректальным раком, а именно для повышения эффективности противоопухолевой терапии и прогноза заболевания.

Бесплатно

Молекулярные и прогностические особенности глиобластом с отсутствием мутаций генов IDH/BRAF/H3F3A у молодых пациентов

Рыжова М.В., Абсалямова О.В., Голанов А.В., Пицхелаури Д.И., Снигирева Г.П., Воронина Е.И., Шишкина Л.В., Панина Т.Н., Шибаева И.В., Шугай С.В., Старовойтов Д.В., Баринов А.А., Сычева Р.В., Зубова И.В.

Статья научная

Резюме Исследование посвящено изучению глиобластом у лиц молодого возраста в возрасте от 19 до 44лет. Цель исследования. Стратификация глиобластом у лиц молодого возраста с отсутствием мутаций (диким типом) генов IDH/BRAF/H3F3A. Материалы и методы. Исследование проведено с помощью изучения структуры метилирования ДНК на уровне генома и иерархического кластерирования на серии из 91 опухоли, в геноме которых отсутствуют мутации генов IDH/BRAF/H3F3A. Результаты. Выявлено два молекулярных кластера, что будет иметь важное значение для дальнейшей стратификации пациентов в последующих клинических испытаниях и для изучения оптимальных альтернативных терапевтических режимов. Заключение. Благодаря использованию сложных молекулярных методов и математического анализа, в работе показана гетерогенность глиобластом с отсутствием мутаций генов IDH/BRAF/H3F3A у молодых пациентов. Выявленные два молекулярных подтипа опухоли показали четкую взаимосвязь с биологическими параметрами и клиническим исходом и могут послужить предиктивным фактором ответа на стандартные протоколы лечения и возможной таргетной терапии. Однако, на сегодняшний день в условиях рутинной диагностики глиобластом по-прежнему целесообразным представляется исследование мутационного статуса генов IDH1/2, BRAF, H3F3A, TERT, TP53, ATRX и статуса метилирования гена MGMT.

Бесплатно

Молекулярный Пап-тест в постменопаузе

Мельникова Н.В., Захаренко М.В., Яровая Н.Ю., Антонова И.Б., Бабаева Н.А., Болотина Н.А., Акопова Н.Б., Боженко В.К.

Статья научная

В работе проанализированы перспективы дифференциальной диагностики предраковых процессов и рака шейки матки у женщин в постменопаузе. Впервые показана возможность точной классификации 5-ти клинически важных групп: доброкачественные изменения, LSIL (низкая степень плоскоклеточного интраэпителиального поражения), HSIL (высокая степень плоскоклеточного интраэпителиального поражения), плоскоклеточный рак и эндоцервикальная аденокарцинома у пациенток в постменопаузе на основе анализа экспрессии мРНК 24 генов по материалу консервирующего раствора Пап-теста CellPrep. Дискриминантный анализ выявил 6 генов, оказывающих наибольшее влияние на правильность классификации. Разработанная методика перспективна для рефлексного тестирования в практике цитологической диагностики предраковых процессов и рака шейки матки у женщин в постменопаузе и является базовой моделью для внедрения в скрининг рака шейки матки молекулярного Пап-теста.

Бесплатно

Мутационный статус генов RAS-каскада у больных колоректальным раком

Телышева Е.Н., Новицкая Н.Н., Снигирева Г.П., Солодкий В.А.

Статья научная

Молекулярно-генетический анализ мутационного статуса генов RAS-каскада - KRAS, NRAS и BRAF имеет важное прогностическое и предиктивное значение при лечении колоректального рака (КРР). В работе представлены результаты анализа частоты и спектра мутаций в генах RAS-каскада у 355 больных КРР, проходивших лечение в РНЦРР. Группу исследования составили пациенты в возрасте от 22 до 86 лет: 165 женщин и 190 мужчин. Показано, что частота мутаций в исследуемых генах достаточно высокая и составляет 48,2%. Мутации в гене KRAS, частота которых составила 40,6%, в основном представлены точечными заменами в 12-м и 13-м кодонах 2-го экзона. Изменения в гене BRAF встретились 6,2% случаев и были представлены единственным вариантом - мутацией V600E в 15-м экзоне. У пяти больных была выявлена мутация Q61K в гене NRAS, что составило 1,4%. Результаты генетического тестирования больных КРР наглядно демонстрируют необходимость и важность проведения молекулярно-генетического исследования, которое позволяет не только индивидуализировать терапию за счет оптимизации схем лечения, но и сократить экономические затраты при назначении таргетных и традиционных химиопрепаратов.

Бесплатно

Определение риска локорегиональных рецидивов рака молочной железы после органосохраняющего лечения на основе анализа экспрессии генов

Пасько М.А., Захаренко М.В., Троценко И.Д., Кудинова Е.А., Чхиквадзе В.Д., Боженко В.К.

Статья научная

Цель: Проанализировать уровень экспрессии 21 гена, участвующего в процессах апоптоза, пролиферации, дифференцировки при раке молочной железы, в случаях развития локорегионарных рецидивов и при длительной ремиссии. На основе этих данных попытаться создать прогностическую модель, оценивающую риск возникновения локорегионарных рецидивов после органосохраняющего лечения на основе уровня экспрессии генов. Материалы и методы: Были исследованы 53 образца ткани первичной опухоли рака молочной железы (РМЖ), полученной от пациенток после органосохраняющего лечения (ОСЛ). 14 образцов были взяты у больных, у которых развился ЛРР, группу сравнения составили 39 пациентов с ремиссией в течение 5 лет. Результаты: Изучена экспрессия 21 гена методом ПЦР в реальном времени, определены уровни экспрессии в группах прогрессирования и ремиссии. В 71,4 % случаев дискриминантный анализ исследуемых генов позволяет спрогнозировать возникновение локорегионарного рецидива в исходной выборке и в 94,8 % исключить его появление. Заключение: Анализ уровней экспрессии генов позволяет создать алгоритм, предсказывающий развитие локорегионарных рецидивов после органосохраняющего лечения рака молочной железы.

Бесплатно

Опыт изучения статуса метилирования промоторной области гена MGMT как основа для создания регистра пациентов с опухолями центральной нервной системы

Рыжова М.В., Снигирева Г.П., Григорьева Т.В., Старовойтов Д.В., Никитин П.В., Шайхаев Е.Г., Телышева Е.Н., Шишкина Л.В., Панина Т.Н., Шибаева И.В., Шугай С.В., Сычева Р.В., Зубова И.В.

Статья научная

Резюме Исследование посвящено изучению статуса метилирования промоторной области гена MGMT у пациентов с опухолями центральной нервной системы. Цель исследования: изучить статус метилирования промоторной области гена MGMT у пациентов с различными гистологическими типами злокачественных новообразований ЦНС. Материал и методы. Исследование проведено с помощью метил-специфической полимеразной цепной реакции в реальном времени на серии из 244 опухолей. Результаты исследования. Проанализирован статус метилирования гена MGMT в серии из 244 образцов преимущественно глиальных опухолей у взрослых пациентов. В 74 случаях (30%) опухоли имели метилированный ген MGMT. Создана молекулярно-генетическая база данных пациентов со злокачественными заболеваниями головного мозга. Заключение. Полученные результаты молекулярно-генетического исследования станут основой для создания базы данных пациентов с нейрохирургической патологией. Выявленные клинические и молекулярно-генетические характеристики в ближайшем будущем могут быть использованы для разработки современных подходов к прогнозированию и лечению злокачественных заболеваний ЦНС.

Бесплатно

Оценка антипролиферативной активности пептидного ингибитора E2F в условиях in vitro

Кулинич Т.М., Иванов А.В., Захаренко М.В., Горбаренко А.В., Боженко В.К.

Статья научная

Соединение возможности целевой доставки пептидов в клетку и обнаружение коротких функциональных доменов в белках регуляторах различных клеточных функций создали предпосылки для конструирования молекул, имеющих патогенетическую направленность. Относительная простота синтеза таких молекул позволяет говорить о принципиальной возможности создания на их основе индивидуальных химиопрепаратов, т.е. соединений, влияющих на патологические изменения свойственных данной конкретной опухоли. Белки семейства E2F - перспективные мишени для создания новых противоопухолевых препаратов. Они являются ключевыми эффекторами сигнального пути Cdk-Rb-E2F, и возможность воздействия на их активность открывает большие возможности в регулировании пролиферативной активности опухолевых клеток. В статье приведены результаты исследования антипролиферативных свойств последовательности пептидного ингибитора E2F1 на клеточных линиях рака легкого и колоректального рака.

Бесплатно

Оценка связи экспрессии рецепторов стероидных гормонов методом ОТ-ПЦР с уровнем пролиферации и апоптоза в ткани рака молочной железы

Троценко Иван Дмитриевич, Рожкова Надежда Ивановна, Харченко Наталья Владимировна, Кудинова Елена Александровна, Запиров Гаджимурад Магомедович, Боженко Владимир Константинович

Статья научная

В проведенном исследовании установлено, что в ткани рака молочной железы экспрессия мРНК рецепторов эстрогена и прогестерона может как повышаться, так и снижаться относительно значений окружающей морфологически неизмененной ткани. Повышение экспрессии мРНК рецептора прогестерона отмечается в опухолях с пониженной пролиферативной и антиапоптотической активностью.

Бесплатно

Оценка соотношения пролиферации и апоптоза в ткани молочной железы в норме и при гиперпролиферативных процессах

Кудинова Е.А., Боженко В.К., Кулинич Т.М., Джикия Е.Л., Захаренко М.В., Макарова М.В., Мельникова Н.В.

Статья научная

Исследование проведено с целью определения универсальных индексов, отражающих баланс процессов пролиферации и апоптоза в тканях молочной железы в норме и при различных патологических процессах. В биопсийном материале образцов рака молочной железы, тканей фиброаденомы и неизмененной ткани молочной железы методом проточной цитофлуорометрии определены значения уровня апоптоза и количество клеток вразных фазах клеточного цикла. На основании анализа полученных результатов выполнена оценка баланса процессов апоптоза и пролиферации в исследуемых тканях и предложены индексы, отражающие активность данных процессов в ткани. Показано, что при гиперпролиферативных процессах молочной железы клеточный баланс, оцененный с помощью предложенных индексов, изменен в сторону увеличения клеточной популяции.

Бесплатно

Оценка экспрессии мРНК гена Р16 при цервикальных интраэпителиальных неоплазиях и раке шейки матки

Мельникова Н.В., Боженко В.К., Ашрафян Л.А., Антонова И.Б., Алешикова О.И., Бурменская О.Н., Трофимов Д.Ю., Кудинова Е.А., Хунова Л.З., Двинских Н.Ю.

Статья научная

В статье анализируются возможности оценки экспрессии мРНК гена p16 методом количественной ПЦР при цервикальных интраэпителиальных неоплазиях и раке шейки матки.

Бесплатно

Первично-множественный рак молочной железы (комплексная лучевая и молекулярно-генетическая диагностика)

Фролов И.М., Телышева Е.Н., Новикова Е.И., Агаджанян А.В., Фастовец Ю.Н., Снигирева Г.П.

Статья научная

Профилактика и лечение первично-множественного рака молочной железы (ПМРМЖ), как синхронного, так и метахронного, во многом зависят от ранней диагностики заболевания, основными методами которой на сегодняшний день являются лучевые. Важную роль в предрасположенности к возникновению ПМРМЖ играют генетические факторы. Цель работы. Анализ эффективности комплексного лучевого и молекулярногенетического обследования женщин с ПМРМЖ для выбора рациональной тактики лечения. Методы. В обследование было включено 107 пациенток с ПМРМЖ, которым проводилась комплексная лучевая диагностика и молекулярно-генетическое тестирование на наличие наследственных мутаций в генах BRCA1/2. Результаты. При возникновении первого рака в возрасте до сорока лет риск развития второго рака составляет около 60%. Если первый рак диагностировали у женщин старше сорока лет, то риск возникновения второго (метахронного) рака составляет 25%. ПМРМЖ чаще развивается у носителей мутаций в генах BRCA1/2 по сравнению с больными из общей популяции. Заключение. Выявленный высокий процент носителей наследственных мутаций среди пациенток с ПМРМЖ обуславливает необходимость проведения молекулярногенетического анализа, результаты которого позволяют корректировать методы лечения и профилактики заболевания с применением персонифицированного подхода.

Бесплатно

Радиологические технологии и биогенетические маркеры в дифференциальной диагностике заболеваний молочной железы, сопровождающихся скоплениями микрокальцинатов

Якобс Ольга Эдмундовна, Кудинова Елена Александровна, Рожкова Надежда Ивановна, Боженко Владимир Константинович

Статья научная

Цель: разработать высокоэффективный симптомокомплекс, характерный для рака молочной железы путем оценки возможностей инвазивных лучевых технологий, взаимосвязи экспрессии мРНК маммаглобина с рентгено-сонографической картиной микрокальцинатов разной природы. Материалы и методы: обследовано 253 женщины (290 случаев) с наличием на маммограммах скоплений микрокальцинатов разной природы: рак (n=124),доброкачественные изменения - (n=166). В комплекс обследования входили неинвазивные и инвазивные рентгенологические и ультразвуковые технологии, патоморфологическое исследование, полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.Результаты: чувствительность комплексного клинико-рентгено-сонографического обследования составила 96,7%, специфичность - 100%, точность - 98,6%. Вакуумная биопсия под рентгенологическим наведением информативна в 100%.Заключение: повышенный уровень экспрессии мРНК маммаглобина характерен для выраженной мастопатии. Выявлено повышение экспрессии мРНК генов GRB7, Her2/neu при РМЖ, сопровождающееся скоплением микрокальцинатов, в отличие от РМЖ без них.

Бесплатно

Результаты выявления, типирования и количественного определения вируса папилломы человека методом ПЦР в практике жидкостной цитологии у женщин в постменопаузе

Мельникова Н.В., Антонова И.Б., Бабаева Н.А., Болотина Н.А., Акопова Н.Б., Яровая Н.Ю., Шайхаев Е.Г., Боженко В.К.

Статья научная

В работе проанализированы возможности выявления, типирования и количественного определения вируса папилломы человека (ВПЧ) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) по материалу консервирующего раствора Пап-теста CellPrep в сравнении с результатами цитологического и гистологического исследования. Установлено, что для пациенток с гистологически верифицированными HSIL (высокая степень плоскоклеточного интраэпителиального поражения) подтверждена наивысшая распространенность (100%) любого канцерогенного типа ВПЧ: доминировали ВПЧ ВКР 16 и 33 типа с клинически значимой нагрузкой. В случае ВПЧ-ассоциированной эндоцервикальной аденокарциномы подтвержден ВПЧ 18 типа со значимой вирусной нагрузкой. С учетом ложноположительных цитологических заключений о LSIL (низкая степень плоскоклеточного интраэпителиального поражения, n=4) и HSIL (высокая степень плоскоклеточного интраэпителиального поражения, n=1) чувствительность цитологического исследования была 87,5%. При пороге позитивности LSIL для гистологически подтвержденных изменений HSIL+ с учетом ложноположительных заключений о присутствии ВПЧ в случае доброкачественного характера процесса (n=10) чувствительность ВПЧ ДНК тестирования составила 88,24%, что лучше результатов цитологического исследования Пап-теста. Требуется углубленная оценка возможностей рефлексного тестирования для ВПЧ-неассоциированных эндоцервикальных аденокарцином.

Бесплатно

Роль молекулярно-генетического исследования при колоректальном раке (описание клинического случая)

Телышева Е.Н., Станоевич У.С., Снигирева Г.П.

Статья научная

Встатье представлены результаты молекулярно-генетического исследования, проведенного на образцах ДНК опухолевой ткани и ДНК, выделенной из плазмы крови, больной с колоректальным раком. Показана прогностическая роль выявленных изменений в генах, участвующих в патогенезе колоректального рака.

Бесплатно

Связь уровня апоптоза и экспрессии рецепторов эстрогена при раке молочной железы

Кудинова Е.А., Кулинич Т.М., Мельникова Н.В., Ооржак Айлан Владимировна, Боженко В.К.

Статья научная

Тканевой гомеостаз в молочной железе обеспечивается в результате равновесия между пролиферацией и апоптозом. Уровень апоптоза в ткани рака молочной железы достоверно положительно коррелирует с уровнем экспрессии рецепторов эстрогена в группе протокового рака молочной железы. Однако в группе долькового рака при проведении неоадьювантной химиотерапии уровень апоптоза в клетках опухоли снижается. Спонтанный апоптоз положительно коррелирует с уровнем пролиферативной активности в ткани рака молочной железы (коррелирует с величиной G2M). В группе анеуплоидных опухолей спонтанный апоптоз положительно коррелирует с индексом плоидности, но не отличается в диплоидных и анеуплоидных опухолях.

Бесплатно

Связь экспрессии маммаглобина с рентгенологическими признаками при фиброаденоме молочной железы

Боженко Владимир Константинович, Харченко Наталья Владимировна, Васкевич Елена Федоровна, Кудинова Елена Александровна, Ооржак Айлан Владимировна, Якобс Ольга Эдмундовна, Троценко Иван Дмитриевич

Статья научная

Маммаглобин является перспективным специфическим маркером раннего рака молочной железы, экспрессия которого коррелирует с такими клинико-морфологическими характеристиками опухоли как размер узла, степень злокачественности и т.д., однако закономерности экспрессии мРНК маммаглобина в зависимости от рентгенологических признаков остаются малоизученными. Материалы и методы: С использованием метода ПЦР в реальном времени была проанализирована экспрессия мРНК маммаглобина у 42 пациенток с диагнозом фиброаденома молочной железы. Проанализировано 84 образца морфологически неизмененной ткани и фиброаденомы (ФА) молочной железы. Оценивалась связь экспрессии маммаглобина с наличием четких контуров образования, диффузных изменений, наличием фиброзно-кистозной мастопатии, фиброзно-жировой инволюции по данным маммаграфии. Результаты: Среднее значение экспрессии мРНК маммаглобина при сравнении групп «без диффузных изменений» и «фиброзно-жировая инволюция» достоверно различимы (р=0,00039). Cредний уровень экспрессии мРНК маммаглобина в группе пациенток с выраженной ФКМ практически в три раза отличался от групп с нерезкой и умеренной ФКМ (Р

Бесплатно