Использование ESI-MS и изотопно меченных аминокислотных стандартов для определения концентрации белков
Автор: Новиков А.В., Савельева Н.В., Краснов Н.В., Роепсторфф П., Кернер Р., Миргородская О.А.
Журнал: Научное приборостроение @nauchnoe-priborostroenie
Рубрика: 25 лет институту аналитического приборостроения РАН
Статья в выпуске: 4 т.12, 2002 года.
Бесплатный доступ
Представлен метод количественного определения белков и олигопептидов на пикомольном уровне применительно к ESI-MS. Суть метода заключается в определении концентрации отдельных аминокислот, входящих в состав анализируемого белка, после его гидролиза (кислотного или ферментативного) путем измерения относительных интенсивностей ионов аминокислоты и ее изотопно меченного аналога. В качестве внутренних стандартов использованы 18О-содержащие аналоги 5 аминокислот, а также дейтерированный лизин и модифицированный азотом 15N аргинин. Метод применим для белков с известным аминокислотным составом. Предлагаемый подход опробован на примере определения концентраций бычьего сывороточного альбумина, химотрипсиногена, проинсулина.
Короткий адрес: https://sciup.org/14264262
IDR: 14264262
Список литературы Использование ESI-MS и изотопно меченных аминокислотных стандартов для определения концентрации белков
- Yao X., Freas A., J. Ramirez P., Demirev P.A., Fenselau C. Proteolitic 18O Labeling for Comparative Proteomics: Model Studies with two Serotypes of Adenovirus//Anal. Chem. 2001. V. 75. P. 2836-2842.
- Desiderio D.M., Wirth U., Lovelace J.L., Fridland G., Umstot E.S., Nguyen T. M.-D., Schiller P.W., Szeto H.S., Clapp J.F. Matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometric quantitation of the mu opioid receptor agonist DAMGO in ovine plasma//J. Mass Spectrom. 2000. V. 35. P. 725-733.
- Mirgorodskaya O.A., Kozmin Y.P., Titov M.I., Kőrner R., Sőnksen C.P., Roepstorff P. Quantitation of peptides and proteins by matrix-assisted laser desorption/ionisation mass spectrometry using 18O-labeled internal standards//Rapid Commun. Mass Spectrom. 2000. V. 14. P. 1226-1232.
- Миргородская О.А., Козьмин Ю.П., Титов М.И., Савельева Н.В., Кёрнер Р., Сонксен К., Мирошников А.И., Роепсторфф П. Использование MALDI-MS для количественного анализа пептидов и белков//Биоорганическая химия. 2000. Т. 26. С. 662-671.
- Mirgorodskaya E.P., Mirgorodskaya O.A., Dobretsov S.V., Shevchenko A.A., Dodonov A.F., Kozlovskiy V.I., Raznikov V.V. Electro-spray mass-spectrometric study of melittin trypsinolysis by a kinetic approach//Anal. Chem. 1995. V. 67. P. 2864-2869.
- Mirgorodskaya O., Kazanina G., Roepstorf P., Mirgorodskaya E., Zamolodchikova T., Vorotyntseva T., Miroshnikov A., Alexandrov S. A comparative study of the specificity of proinsulin hydrolysis by duodenase, trypsin and plasmin//Prot. and Peptide Letters. 1998. V. 5. P. 27-32.
